基于“病证效应生物样本分析”方法的桑寄生祛风湿功效物质及归经研究(3)
26炎症因子的检测
ELISA法检测血清中IL1β和TNFα，按试剂盒说明书操作。
27血清样品的处理方法
桑寄生高剂量组大鼠按时间点摘眼球取血，全血1万 r·min-1离心10 min，取15 mL血清，加3倍量甲醇，用快速混匀器充分振摇5 min，1万 r·min-1离心10 min，取上清液，沉淀物再次重复上述操作，合并2次上清液。50 ℃氮气吹干，加入甲醇2 mL，超声提取5 min，取上清液用022 μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。
28组织样品的处理方法
将各组织用生理盐水洗净，滤纸吸干，精密称取约1 g的组织(不足1 g的称全重)，剪碎，加入3倍量生理盐水，用细胞破碎仪破碎。破碎液加入3倍量甲醇，快速混匀器充分振摇5 min，1万 r·min-1离心10 min，取上清液；沉淀物再次重复上述操作，合并2次上清液。50 ℃氮气吹干，加入甲醇2 mL，超声提取5 min，取上清液用022 μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。
29HPLC含量测定方法
291色谱条件同212 ......
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ELISA法检测血清中IL1β和TNFα，按试剂盒说明书操作。
27血清样品的处理方法
桑寄生高剂量组大鼠按时间点摘眼球取血，全血1万 r·min-1离心10 min，取15 mL血清，加3倍量甲醇，用快速混匀器充分振摇5 min，1万 r·min-1离心10 min，取上清液，沉淀物再次重复上述操作，合并2次上清液。50 ℃氮气吹干，加入甲醇2 mL，超声提取5 min，取上清液用022 μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。
28组织样品的处理方法
将各组织用生理盐水洗净，滤纸吸干，精密称取约1 g的组织(不足1 g的称全重)，剪碎，加入3倍量生理盐水，用细胞破碎仪破碎。破碎液加入3倍量甲醇，快速混匀器充分振摇5 min，1万 r·min-1离心10 min，取上清液；沉淀物再次重复上述操作，合并2次上清液。50 ℃氮气吹干，加入甲醇2 mL，超声提取5 min，取上清液用022 μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。
29HPLC含量测定方法
291色谱条件同212 ......
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