内生真菌HLY3中小檗碱的分离鉴定(2)

http://www.100md.com 2016年8月15日 《中国中药杂志》2016年第16期

     2.2 菌株HLY3的形态学观察 菌株在22 ℃培养条件下，前期生长较快，生长速度约为6.8 mm·d-1，中央凹陷为橄榄色，菌丝为白色绒毛状(图1A)；显微镜下菌丝呈树枝状，孢子呈棒状或纺锤状，多个孢子串联成链，有纵横隔膜将单个孢子分成多个细胞，中间细胞较大，两端延长呈喙状(图1B)。

    2.3 菌株 HLY3的分子生物学鉴定 菌株HLY3的5.8S rDNAITS片段长度为570 bp，将该碱基序列在NCBI数据库中进行Blast比对，分析结果显示，HLY3菌株的碱基序列与Alternaria alternata (KP701250.1)，A. arborescens (JQ936167.1)，A. brassicae (KT192271.1)，A. brassicicola (JF439453.1)和A. brassicicola (JF439451.1)的相似率达到了99%，构建系统进化树，鉴定其为交链孢属Alternaria sp.真菌(图 2)。

    2.4 菌株 HLY3菌丝提取物的结构鉴定 ESIMS图谱中显示，小檗碱样品准分子离子峰m/z 337.1[M+H]+及特征碎片离子峰m/z 321.2[M-CH3]+ ......