芫花氯仿萃取物对大鼠及人肝微粒体UGTs及UGT1A1活性影响(3)

http://www.100md.com 2016年9月1日 《中国中药杂志》2016年第17期

     2.5.1 UGTs活性测定 照Bock KW等^[11]报道的方法，以4-NP为底物，紫外分光光度法进行测定。200 μL的温孵体系包括RLM或HLM (0.2 g·L_-1)，丙甲菌素(50 mg·g_-1)，3 mmol·L_-1 UDPGA，100 mmol·L_-1 Tris-HCl，5 mmol·L_-1 MgCl₂，5 mmol·L_-1D-葡萄糖二酸-1，4-内酯，1 mmol·L_-1 4-NP以及100 μmol·L_-1的氯仿萃取物(以芫花素计)。37 ℃预孵育5 min，加入UDPGA启动反应，孵育30 min后，加入5%三氯乙酸2 mL终止反应，13 000×g离心15 min ......