基于p38MAPK通路初探大黄黄芩配伍对内毒素血证模型大鼠肝脏炎症的调节机制(2)

http://www.100md.com 2016年9月15日 《中国中药杂志》2016年第18期

     2方法

    2.1动物分组及给药

    成年雄性SD大鼠50只，适应性饲养1周后，依照体重与平均体温将大鼠均衡分为5组，每组10只，分别设为空白组、模型组、地塞米松组、药对高剂量组(相当于生药4.5 g·kg^-1)、药对低剂量组(相当于生药2.25 g·kg^-1)。各组动物经灌胃分别给予相应药物，每日早晚8：00各给药1次，给药体积为5 mg·kg^-1，连续给药7d，空白组和模型组给予等体积的纯水。

    2.2模型制备及样本采集

    实验前禁食不禁水8h，末次给药结束后，除空白组外各组大鼠经尾静脉注射LPS(5mg·kg^-1)造模，空白组使用等体积的生理盐水进行注射，全部操作均按无菌无热原要求控制。大鼠注射LPS4h后，使用20%乌拉坦(1.0g·kg^-1)麻醉，剖取大鼠肝臟、胸腺、脾脏，并迅速进行称重，采集组织迅速置于液氮中冷冻，然后转至一80℃保存，进而进行后续相关测试(课题组前期分别选取了2，4，6，8，10 h对内毒素血证模型大鼠肝组织炎性因子与TLR4-MAPK信号通路蛋白的变化进行动态研究，结果发现相关炎症指标与蛋白表达在LPS刺激造模后4 h表达升高显著，因此本次选择造模4 h后取样检测进行研究)。

    2.3指标检测

    2.3.1大鼠体温变化测定

    于注射LPS造模结束后0.5 ......