西瑞香素半乳糖化脂质体在大鼠体内组织分布的研究(2)
西瑞香素半乳糖化脂质体(Gal-DAP-LP)的制备:除在无水乙醇中加入10%的半乳糖配体外,其他步骤同上。
2.4组织生物样品的处理
取大鼠各组织脏器,除小肠和胃剪开去除内容物后用生理盐水清洗外,其余器官用生理盐水洗净表面浮血,滤纸吸干,置一20℃冷冻保存。测定前取出组织样本,解冻后称质量,剪碎,置于玻璃匀浆器中,加2倍量生理盐水在冰浴中研成匀浆,制成组织匀浆液。分别取各组织匀浆500μL,置于10 mL离心管中,精密加入内标补骨脂素溶液(4.0 mg·L-1)50μL,涡旋30秒,加入乙腈1mL,涡旋5min,再加入醋酸乙酯5 mL,涡旋混合5 min,以12000r·min-1。离心5min,取上清液,N,吹干(40℃水浴),残渣加色谱甲醇100μL,涡旋5 min,以12 000r·min-1离心5min,吸取上清液置内衬管中,即得。
2.5方法学验证
2.5.1专属性考察取大鼠各空白组织匀浆,除不加内标溶液外,其余按2.4项下方法处理,获得空白组织色谱图;将一定浓度的西瑞香素对照品溶液和内标溶液加入大鼠空白组织匀浆中,同法操作,获得空白组织加西瑞香素与内标色谱图;取大鼠给药后的各组织匀浆,同法操作,获得给药后大鼠各组织色谱图,各组织脏腑中色谱图见图1。从色谱图可以看出 ......
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2.4组织生物样品的处理
取大鼠各组织脏器,除小肠和胃剪开去除内容物后用生理盐水清洗外,其余器官用生理盐水洗净表面浮血,滤纸吸干,置一20℃冷冻保存。测定前取出组织样本,解冻后称质量,剪碎,置于玻璃匀浆器中,加2倍量生理盐水在冰浴中研成匀浆,制成组织匀浆液。分别取各组织匀浆500μL,置于10 mL离心管中,精密加入内标补骨脂素溶液(4.0 mg·L-1)50μL,涡旋30秒,加入乙腈1mL,涡旋5min,再加入醋酸乙酯5 mL,涡旋混合5 min,以12000r·min-1。离心5min,取上清液,N,吹干(40℃水浴),残渣加色谱甲醇100μL,涡旋5 min,以12 000r·min-1离心5min,吸取上清液置内衬管中,即得。
2.5方法学验证
2.5.1专属性考察取大鼠各空白组织匀浆,除不加内标溶液外,其余按2.4项下方法处理,获得空白组织色谱图;将一定浓度的西瑞香素对照品溶液和内标溶液加入大鼠空白组织匀浆中,同法操作,获得空白组织加西瑞香素与内标色谱图;取大鼠给药后的各组织匀浆,同法操作,获得给药后大鼠各组织色谱图,各组织脏腑中色谱图见图1。从色谱图可以看出 ......
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