延胡索及其有效成分抗吗啡成瘾多巴胺系统作用机制研究和效果比较(2)
2.2 药物治疗 吗啡CPP模型建立成功后,对模型各组大鼠给予药物灌胃治疗,延胡索高、中、低剂量组给予延胡索2,1,0.5 g·kg-1水提液,LTHP高、中、低剂量组给予LTHP 3.76,1.88,0.94 mg·kg-1溶液,灌胃体积均为10 mL·kg-1,生理盐水治疗组给予等体积生理盐水灌胃,1次/d,连续6 d。并于第6天灌胃治疗后再次CPP测试各组大鼠在白箱的停留时间。
2.3 高效液相检测递质 各组取10只大鼠经戊巴比妥钠麻醉后,断头处死,开颅取脑,取组织称重后置2 mL匀浆器中,加入300 μL含0.1 mol·L-1的HClO4和0.2 mmol·L-1的EDTA2Na的混合溶液,匀浆,4 ℃ 12 000 r·min-1离心10 min,取50 μL上清液进样。
2.4 Western blot检测DAT和D2R 各组取12只大鼠经戊巴比妥钠麻醉后,断头处死,开颅取脑,取组织称重,将收集的样品置4 ℃预冷裂解缓冲液中匀浆,离心后取上清,取少量上清用BCA 蛋白试剂盒检测蛋白浓度后,上清与上样缓冲液混匀 ......
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2.3 高效液相检测递质 各组取10只大鼠经戊巴比妥钠麻醉后,断头处死,开颅取脑,取组织称重后置2 mL匀浆器中,加入300 μL含0.1 mol·L-1的HClO4和0.2 mmol·L-1的EDTA2Na的混合溶液,匀浆,4 ℃ 12 000 r·min-1离心10 min,取50 μL上清液进样。
2.4 Western blot检测DAT和D2R 各组取12只大鼠经戊巴比妥钠麻醉后,断头处死,开颅取脑,取组织称重,将收集的样品置4 ℃预冷裂解缓冲液中匀浆,离心后取上清,取少量上清用BCA 蛋白试剂盒检测蛋白浓度后,上清与上样缓冲液混匀 ......
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