淫羊藿苷通过影响MAPK信号通路抑制oxLDL诱导的血管平滑肌细胞增殖作用研究(2)
1.6 ICA对oxLDL诱导VSMC增殖细胞周期的影响 将生长良好、处于对数期的VSMC接种于6孔细胞培养板，实验分组、细胞培养及药物干预方法同1.5项，各组细胞最后经oxLDL(终浓度50 mg·L-1)刺激24 h后，收集细胞，用流式细胞仪检测细胞周期时相。
1.7 ICA对oxLDL诱导VSMC增殖相关蛋白及基因表达的影响 将生长良好、处于对数期的VSMC接种于6孔细胞培养板，实验分组、细胞培养及药物干预方法同1.5项，各组细胞最后经oxLDL(终浓度50 mg·L-1)刺激24 h后，收集细胞。采用Western blot法半定量检测VSMC内 p38，ERK1/2，JNK等蛋白磷酸化情况及PCNA蛋白的表达水平，具体操作步骤如下：将预收集的细胞用冰PBS冲洗3次，加入蛋白抽提试剂，取上清，用BCA蛋白定量试剂盒说明书进行蛋白定量，加5×上样缓冲液煮沸5 min。等量蛋白(50 μg)上样，10% SDSPAGE分离胶电泳分离蛋白后，电移至PVDF膜(4 ℃，100 V，1 h) ......
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1.7 ICA对oxLDL诱导VSMC增殖相关蛋白及基因表达的影响 将生长良好、处于对数期的VSMC接种于6孔细胞培养板，实验分组、细胞培养及药物干预方法同1.5项，各组细胞最后经oxLDL(终浓度50 mg·L-1)刺激24 h后，收集细胞。采用Western blot法半定量检测VSMC内 p38，ERK1/2，JNK等蛋白磷酸化情况及PCNA蛋白的表达水平，具体操作步骤如下：将预收集的细胞用冰PBS冲洗3次，加入蛋白抽提试剂，取上清，用BCA蛋白定量试剂盒说明书进行蛋白定量，加5×上样缓冲液煮沸5 min。等量蛋白(50 μg)上样，10% SDSPAGE分离胶电泳分离蛋白后，电移至PVDF膜(4 ℃，100 V，1 h) ......
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