松针提取物α—蒎烯对肝癌HepG2细胞miR—221及其下游靶基因表达的影响(3)
3.2α-蒎烯对HepG2细胞miR-221表达的影响
由于α-蒎烯干预后细胞主要阻滞于G2/M期，且随浓度增高而增高，因此本实验进一步以64 μmol·L-1的α-蒎烯干预HepG2细胞，观察G2/M期相关miR-221的表达变化。结果显示64 μmol·L-1α-蒎烯处理HepG2 24 h后，给药组 miR-221的表达水平(0.53±0.12)远低于空白组(1.00±0.08)，二者差异显著(P<0.05)，说明α-蒎烯阻滞HepG2细胞于G2/M期与调控miR-221的表达相关。
3.3 miR-221下游靶基因的生物信息学预测
miRNAs通过调节下游靶基因来发挥其调控作用。本实验采用miRbase和TargetScan在线生物信息学软件对miR-221的靶基因进行预测，结果显示细胞G2/M期调节蛋白CDKN1B/P27，CDKN1C/P57的非编码区可与miR-221结合，提示二者可能作为miR-221的下游靶基因受其调节，见图1。
3.4α-蒎烯对CDKN1B/P27和CDKN1C/P57表达的影响
64 μmol·L-1α-蒎烯处理HepG2细胞 24 h后 ......
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由于α-蒎烯干预后细胞主要阻滞于G2/M期，且随浓度增高而增高，因此本实验进一步以64 μmol·L-1的α-蒎烯干预HepG2细胞，观察G2/M期相关miR-221的表达变化。结果显示64 μmol·L-1α-蒎烯处理HepG2 24 h后，给药组 miR-221的表达水平(0.53±0.12)远低于空白组(1.00±0.08)，二者差异显著(P<0.05)，说明α-蒎烯阻滞HepG2细胞于G2/M期与调控miR-221的表达相关。
3.3 miR-221下游靶基因的生物信息学预测
miRNAs通过调节下游靶基因来发挥其调控作用。本实验采用miRbase和TargetScan在线生物信息学软件对miR-221的靶基因进行预测，结果显示细胞G2/M期调节蛋白CDKN1B/P27，CDKN1C/P57的非编码区可与miR-221结合，提示二者可能作为miR-221的下游靶基因受其调节，见图1。
3.4α-蒎烯对CDKN1B/P27和CDKN1C/P57表达的影响
64 μmol·L-1α-蒎烯处理HepG2细胞 24 h后 ......
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