中药蛋白质组学研究策略(2)

http://www.100md.com 2016年11月15日 《中国中药杂志》2016年第22期

     3.1 蛋白质分离技术 蛋白质分离技术在蛋白质组学中起着至关重要的作用，双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(two dimensional gel electrophoresis， 2DE)是其中一种经典方法，但由于生物样品中蛋白质表达水平的巨大差异，如蛋白质大小的动态范围及表达量丰度的巨大差异，以及二维电泳技术对某些蛋白质的“偏性”，极大的限制了该技术的应用范围[35]。因此，人们发展了多种蛋白质分离技术，如色谱分离技术、毛细管电泳技术、毛细管色谱技术、微流控芯片(Chip)技术等。

    3.2 质谱技术 质谱是最常用的，也是最主要的蛋白质鉴定技术，已经逐步取代了传统的氨基酸组成分析和Edman降解测序。质谱技术的基本原理是将蛋白质样品先经过离子化后，然后根据不同离子间质子与电荷之比(m/z)的差异来分离并确定蛋白质的相对分子质量。因此，离子源、质量分析器和检测器构成了质谱仪的核心组件。应用于蛋白质样品的离子源包括基质辅助激光解吸离子化(MALDI)和电喷雾离子化(ESI)2种。而常用的质量分析器包括傅立叶变换离子回旋共振质谱(FTICR/FT)、线性离子阱质谱(LIT/LTQ)、四级杆离子阱质谱(QIT)和飞行时间质谱(TOF)4种。而质谱检测器也有多种，包括电子倍增管、离子计数器、感应电荷检测器等。

    3.3 蛋白质芯片 蛋白质芯片(protein chip)是将固相载体进行特殊的化学处理 ......