青娥丸方有效成分药动学药效学相关性研究(3)
取大鼠血清样品100 μL置于10 mL具塞离心试管中，加入内标液10 μL，摇振，再加入300 μL乙腈，涡旋混合3 min，4 000 r·min-1离心5 min，上清液转移至小EP管中，12 000 r·min-1高速离心3 min，取上清液5 μL用于UHPLCMS/MS分析。
24药效学实验
选择对数生长期中生长旺盛的人成骨细胞，按细胞密度为8×103个/孔，接种于96孔板中，每孔100 μL，培养24 h，棄去原培养液，换无血清培养液，饥饿细胞24 h，弃去无血清培养液，向96孔板中加入20%浓度的各时间点含药血清培养液，以含10%胎牛血清的培养液为空白对照，每药重复6个孔，每孔100 μL，分别培养48 h后，弃去培养液，加入5 g·L-1 的MTT溶液50 μL，37 ℃培养4 h后，吸净上清液，每孔加入150 μL DMSO，在摇床上振摇10 min使结晶充分溶解，用酶标仪在490 nm处测定吸光值。细胞增殖率=(A样品-A空白)/(A对照-A空白)×100%。
25统计学处理
实验中所有项目检测数据均以±s表示 ......
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24药效学实验
选择对数生长期中生长旺盛的人成骨细胞，按细胞密度为8×103个/孔，接种于96孔板中，每孔100 μL，培养24 h，棄去原培养液，换无血清培养液，饥饿细胞24 h，弃去无血清培养液，向96孔板中加入20%浓度的各时间点含药血清培养液，以含10%胎牛血清的培养液为空白对照，每药重复6个孔，每孔100 μL，分别培养48 h后，弃去培养液，加入5 g·L-1 的MTT溶液50 μL，37 ℃培养4 h后，吸净上清液，每孔加入150 μL DMSO，在摇床上振摇10 min使结晶充分溶解，用酶标仪在490 nm处测定吸光值。细胞增殖率=(A样品-A空白)/(A对照-A空白)×100%。
25统计学处理
实验中所有项目检测数据均以±s表示 ......
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