基于DNA熔解曲线技术的金银花种质鉴定(3)
3.2.3 退火温度筛选 以SSR9118060为引物，依次调整退火为48，50，52，54 ℃，在35循环下进行扩增，HRM分析并对其峰形及Tm进行比较。结果表明不同的温度下Tm差异介于0～1.43，无明显差异，峰形结果显示，温度在50～54 ℃有较为稳定的区分度。
3.2.4 重复性 为测试操作重复性，取1个金银花DNA样品，分成9份，使用SSR9118060为引物同时进行扩增，分析高分辨率熔解曲线分型结果，峰形一致，计算其峰Tm为(79.26±0.07)，(84.86±0.04) ℃；RSD为0.080%，0.050%。将同一个金银花样品分成4份，使用SSR9118060为引物进行扩增，分4次连续进样，分析高分辨率熔解曲线结果，计算其峰Tm为(79.30±0.13)，(85.05±0.24) ℃；RSD为0.18%，0.33%。结果表明该方法重复性较高。
4 讨论
一些农家品种如大毛花、小毛花、大鸡爪花、小鸡爪花、四季花、九丰一号、巨花一号等在山东、河南、河北等主产区广泛种植 ......
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3.2.4 重复性 为测试操作重复性，取1个金银花DNA样品，分成9份，使用SSR9118060为引物同时进行扩增，分析高分辨率熔解曲线分型结果，峰形一致，计算其峰Tm为(79.26±0.07)，(84.86±0.04) ℃；RSD为0.080%，0.050%。将同一个金银花样品分成4份，使用SSR9118060为引物进行扩增，分4次连续进样，分析高分辨率熔解曲线结果，计算其峰Tm为(79.30±0.13)，(85.05±0.24) ℃；RSD为0.18%，0.33%。结果表明该方法重复性较高。
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一些农家品种如大毛花、小毛花、大鸡爪花、小鸡爪花、四季花、九丰一号、巨花一号等在山东、河南、河北等主产区广泛种植 ......
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