13亚细胞——高内涵分析

    细胞经毒物作用受损或死亡时，其内部则表现为细胞器的损伤或病变，如线粒体、溶酶体、内质网等细胞器的损伤。荧光成像技术和高内涵分析(high content analysis，HCA)在亚细胞水平的筛选中应用日益广泛[11]。目前HCA能够实时、动态监测体外肝细胞毒性的多个参数、毒理學机制相关的多个重要的标志分子，主要包括细胞及亚细胞形态与数量、线粒体膜电位、氧化应激及DNA损伤，是评估和预测候选药物肝毒性的高效手段。Fu等[12]利用分离的大鼠线粒体和雷公藤甲素(triptolide，TP)共同孵育，发现TP可浓度依赖性的诱导线粒体的肿胀，增加线粒体渗透性，最终导致线粒体损伤。Wang等[13]运用4种探针(罗丹明123，Hoechst33342，表1常见的肝毒性评价模型

    Table 1Hepatotoxicity evaluation models

    体外模型优点缺点人原代肝细胞较好的体内外相关性，具有完整的代谢酶表达系统，适用于酶诱导实验分离复杂费时，存活时间短，部分CYP450 亚酶的表达量丢失，无法维持肝细胞的极性和代谢功能HepG2最具有代表性和最常用的细胞系，易于培养CYP450酶活很低，几乎检测不到L02是一种正常人胚胎肝细胞 ......