24chi基因表达分析[5] 查阅文献[7]，得到内参基因Ct60s(上游引物5′CATCCATTATCCAACAATC3′，下游引物5′AAGAGTAATCAGTCTCCA3′)的Realtime PCR引物序列。扩增体系20 μL：Thunderbird SYBR qPCR Mix，10 μL；上游引物 1 μL；下游引物 1 μL；cDNA模板 5 μL；dd H2O 3 μL。考察引物扩增曲线、溶解曲线及标准曲线，考察Realtime PCR条件：95 ℃ 30 s，95 ℃ 5 s；Plate Read(52～60 ℃，30 s)，40个循环；95 ℃ 30 s；Plate Read(65 ℃ 5 s，95 ℃ 50 s)。确定条件并测定红花chi和内参基因Ct60s的表达量。

    25数据分析利用BioRad CFX Manager软件分析chs及chi的相对表达量 ......