33TwKAO氨基酸序列的系統进化分析将TwKAO与GenBank下载的其他物种 KAO氨基酸序列进行比对分析，利用 MEGA 60软件采用相邻连接法构建系统进化树，见图3。选取15种植物(包括13种双子叶植物，1种单子叶植物，1种蕨类植物)和2种真菌的KAO氨基酸序列，从进化树中可以看出：双子叶植物、单子叶植物、蕨类植物、真菌聚成单独的分支，其中TwKAO归为双子叶植物分支。

    34TwKAO理化性质及3D结构预测使用ExPASy在线软件ProtParamtool预测TwKAO蛋白得到其相对分子质量5602 kDa，理论等电点889；带负电荷的残基(Asp+Glu)52，带正电荷的残基(Arg+Lys)60；不稳定系数3892，蛋白分类属于稳定蛋白；脂肪系数8969，该蛋白为亲水性蛋白。信号肽预测表明TwKAO为非分泌蛋白，不具有信号肽；亚细胞定位分析显示其可能位于内质网；同时跨膜域分析显示，TwKAO位于膜外，为非膜蛋白。三维同源模型见图4 ......