霍山石斛糖蛋白的分离纯化和毒活性研究(2)
23霍山石斛蛋白的分离提取将干燥粉碎均匀的霍山石斛粉末进行低盐溶液浸提(Nacl 03 mol·L-1、料液比1∶15,室温,12 h),离心(4 ℃,8 000 r·min-1,20 min),取上清液,用饱和度为30%,70%,100%硫酸铵溶液依次分级沉淀(4 ℃,12 h),离心(4 ℃,8 000 r·min-1,20 min),流水透析48 h(02 g·L-1叠氮化钠),聚乙二醇浓缩,分装为蛋白溶液PRⅠ,PRⅡ,PRⅢ,进行SDSPAGE电泳检测。24霍山石斛蛋白的SDSPAGE电泳及蛋白染色和糖染色SDSPAGE电泳[3536],制备5%浓缩胶、12%分离胶,恒压电泳,考马斯亮蓝染色和PAS染色,采用凝胶成像系统数据处理软件,根据蛋白Marker,计算出糖蛋白的相对分子质量。SDSPAGE 电泳结果见图1,可知霍山石斛蛋白溶液PRⅠ,PRⅡ,PRⅢ泳道中均含有未知蛋白条带,但只有蛋白溶液PRⅡ泳道中含有3条较明显的糖蛋白条带 ......
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