25Western blot取对数生长期的K562细胞，调整细胞浓度到5×108 个/L，接种到细胞培养瓶中。实验分组为对照组和药物组(S)Rh2(20，40，60 μmol·L-1)，置培养箱中常规培养。提取蛋白并将各组蛋白浓度调成4 g·L-1，沸水中煮沸5 min，蛋白完全变性后，冷却，每个样品取10 μL加入泳道中，保证每孔中有40 μg待测蛋白样品，行SDSPAGE电泳，电转移至PVDF膜；5%脱脂奶粉室温封闭2 h后，分别加入抗体MAPK信号通路抗体按1∶500稀释；Bcl2，Bax，Caspase3(激活型)，LC3A和LC3B按1∶1 000稀释抗体，及Beclin1和βactin按1∶2 000稀释抗体，4 ℃孵育过夜；用TBST漂洗3次，每次10 min置于脱色摇床上；分别加入以1∶2 000稀释的辣根过氧化物酶标记二抗，再用TBST漂洗3次，每次10 min置于脱色摇床上；最后在保鲜膜上滴入ECL化学发光液，在暗室进行X胶片曝光，洗片，胶片晾干后 ......