玄参中β葡萄糖苷酶活性测定条件及干燥过程中酶活性变化的研究(3)
3结果31不同缓冲液对酶提取的影响
设计2种提取缓冲液体系,柠檬酸柠檬酸钠缓冲液和柠檬酸磷酸氢二钠缓冲液,可见在此范围内随着pH增大,酶活力增大,且柠檬酸磷酸氢二钠处理的酶活性均明显高于柠檬酸柠檬酸钠,故选择柠檬酸磷酸氢二钠作为提取缓冲液较为合适。结果见图2。
32柠檬酸磷酸氢二钠缓冲液pH对酶提取的影响
可见缓冲液pH对提取β葡萄糖苷酶会产生较大影响。当提取液为pH 70的磷酸氢二钠柠檬酸缓冲液时效果最好, 酶活力达到最大。结果见图2。
33酶反应环境对酶活力的影响
331反应溶液pH当反应体系pH 35~60时,测得的玄参中的β葡萄糖苷酶活力高,相对活性90%以上,可见随着pH升高,酶活力先增大后逐渐降低。
332反应温度可见50 ℃较其余温度条件下生成对硝基苯酚量最大。
333反应时间可见30 min时生成对硝基苯酚量最大。
334底物浓度可见pNPG浓度由5 mmol·L-1增加到25 mmol·L-1时酶活力逐渐增大,当达到30 mmol·L-1时,酶活力并未增加,故测定玄参中的β葡萄糖苷酶活力的最适底物浓度为25 mmol·L-1,结果见图3。
34测定条件的优化
341均匀设计采用DPS705数据处理系统对均匀设计实验结果按二次多项式逐步回归方法进行分析 ......
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