免疫检测技术在中药质量快速评价中的应用(2)
1.1 抗原中药成分种类繁多,根据化合物相对分子质量大小通常可分为2类,一是大分子物质,如蛋白质、氨基酸、多糖类(淀粉、纤维素、植物凝集素等);另一类是小分子物质(相对分子质量小于5 000),如黄酮类、有机酸类、生物碱类、皂苷类、萜类、蒽醌类物质等。从免疫学的角度来讲,大分子物质既具有免疫原性又具有反应原性,属于完全抗原,而小分子物质只具有反应原性而不具有免疫原性,无法刺激动物产生免疫应答,属于半抗原。中药中小分子物质占到90%以上,为了制备抗体和建立相应的免疫检测方法,需要将小分子物质与蛋白质载体相结合制备成完全抗原。人工抗原的合成方法主要是基于小分子化合物的活性基团来选择,如针对羧基多采用碳二亚胺法、活泼酯法、琥珀酸酐法;氨基多采用戊二醛法;糖基可采用高碘酸钠法;酚羟基可采用混合酸酐法;芳香氨基采用重氮化法等。廖国平[1]、赵宁毅[2]等对中药成分半抗原的制备方法、原则、佐剂和载体的选择以及完全抗原的鉴定方法等均做了详细介绍。
1.2 抗体
根据抗体的来源及应用不同,可将抗体分为多克隆抗体(pAb)、单克隆抗体(mAb)、基因工程抗体3种。多克隆抗体通常是从致敏后的动物血液中分离血清直接使用,或进一步纯化后得到,但仍有较多杂蛋白。单克隆抗体是指由一个B细胞分泌的 ......
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