白术中内酯类成分的TLC鉴别与UPLC含量测定(1)
[摘要]建立白术的薄层鉴别与其中3种内酯类成分含量同时测定方法。使用硅胶GF254薄层板对白术进行定性鉴别；利用UPLC-PDA梯度洗脱法同时测定白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，选用Waters BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm，1.7 μm)，流动相为乙腈-水，检测波长235 nm。薄层鉴别特征明显，专属性强；含量测定的方法学考察结果符合规定，白术内酯Ⅰ， Ⅱ，Ⅲ线性关系良好(r>0.999 9)，平均回收率分别为93.48%(RSD 1.4%)， 94.97%(RSD 1.6%)， 92.71%(RSD 1.2%)。所建立的白术薄层鉴别方法专属性强、重复性好，3种内酯类成分同时测定方法操作简单、灵敏度高，两者结合可以更好的用于白术的质量评价。
[关键词]白术； 白术内酯； 薄层鉴别； 超高效液相色谱； 质量评价
[Abstract]This research is to establish TLC and UPLC methods for simultaneous determination of 3 atractylenolides in Atractylodes macrocephala. Silica gel GF254 plate was used for identification of A. macrocephala， and UPLC-PDA gradient elution method was used to simultaneously determine atractylenolide Ⅰ， Ⅱ and Ⅲ. The Waters BEH C18 column(2.1 mm×100 mm，1.7 μm)with acetonitrile-water as mobile phase and the wavelength of UV detector of 235 nm were performed. The quality control study showed that the characteristic for identification by TLC was distinct and highly specific. The method of content determination was in accordance with the regulations. The quantitative evaluation of atractylenolide Ⅰ，Ⅱ and Ⅲ was in good linear range(r>0.999 9)， and the average recovery was 93.48%(RSD 1.4%)，94.97%(RSD 1.6%)，92.71%(RSD 1.2%)，respectively. TLC identification was in good specificity and repeatability， and the UPLC-PDA method for the simultaneous determination of 3 atractylenolides was simple and reliable for the quality control of A.macrocephala.
, 百拇医药
[Key words]Atractylodes macrocephala； atractylenolide； TLC； UPLC； quality control
白術为菊科植物白术Atractylodes macrocephala Koidz.的根茎，具健脾益气、燥湿利水、止汗安胎之功，用于脾虚食少、腹胀泄泻、痰饮、眩悸、水肿、自汗、胎动不安等症[1]。主要化学成分为挥发油，如
苍术酮、苍术醇等；内酯类成分，如白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ、双白术内酯等[2-4]。2015年版《中国药典》(一部)白术的质量标准[5]中，TLC鉴别仅以苍术酮为指标成分，尚无含量测定项。而苍术酮是我国传统中药白术及苍术(Rhizoma Atractylodis)等苍术属药用植物挥发油的主要活性成分[6]，仅用苍术酮作为白术的鉴别指标不具有专属性。此外，白术中白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ也为白术的主要活性成分[7]，但相对苍术酮来说含量较低，药典中只用含量较高的苍术酮作为质量控制指标，不能全面反映白术的质量，因此增加除苍术酮以外的白术内酯类成分的TLC鉴别及建立相应的含量测定方法，对于提升白术及含白术的成方制剂的质量控制具有重要意义和价值。
, http://www.100md.com
关于白术的薄层鉴别，除苍术酮之外未见有其他成分的研究，本实验参考其他有关内酯类成分的鉴别研究[8-9]，根据该类成分的理化性质，增加了以白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ为指标成分并结合苍术酮的薄层鉴别方法，该方法专属性强，效果较好。关于白术的含量测定方面，以白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ以及苍术酮多见，研究多采用GC测定苍术酮、苍术醇等挥发性成分的含量[10-11]，以HPLC测定白术中内酯类成分[12]，未见有用UPLC在同波长下同时测定白术中白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ含量的分析方法[13-14]。本文基于UPLC-PDA建立了同时测定白术中白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ含量的分析方法，相对于HPLC具有检测灵敏度较好，分析周期短、进样量少和成本节约等特点，为建立全面可控的白术质量评价方法奠定基础。
1 材料
1.1 仪器, http://www.100md.com(赵玉娇 徐文慧 沈小丽 田俊生 秦雪梅)
[关键词]白术； 白术内酯； 薄层鉴别； 超高效液相色谱； 质量评价
[Abstract]This research is to establish TLC and UPLC methods for simultaneous determination of 3 atractylenolides in Atractylodes macrocephala. Silica gel GF254 plate was used for identification of A. macrocephala， and UPLC-PDA gradient elution method was used to simultaneously determine atractylenolide Ⅰ， Ⅱ and Ⅲ. The Waters BEH C18 column(2.1 mm×100 mm，1.7 μm)with acetonitrile-water as mobile phase and the wavelength of UV detector of 235 nm were performed. The quality control study showed that the characteristic for identification by TLC was distinct and highly specific. The method of content determination was in accordance with the regulations. The quantitative evaluation of atractylenolide Ⅰ，Ⅱ and Ⅲ was in good linear range(r>0.999 9)， and the average recovery was 93.48%(RSD 1.4%)，94.97%(RSD 1.6%)，92.71%(RSD 1.2%)，respectively. TLC identification was in good specificity and repeatability， and the UPLC-PDA method for the simultaneous determination of 3 atractylenolides was simple and reliable for the quality control of A.macrocephala.
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[Key words]Atractylodes macrocephala； atractylenolide； TLC； UPLC； quality control
白術为菊科植物白术Atractylodes macrocephala Koidz.的根茎，具健脾益气、燥湿利水、止汗安胎之功，用于脾虚食少、腹胀泄泻、痰饮、眩悸、水肿、自汗、胎动不安等症[1]。主要化学成分为挥发油，如
苍术酮、苍术醇等；内酯类成分，如白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ、双白术内酯等[2-4]。2015年版《中国药典》(一部)白术的质量标准[5]中，TLC鉴别仅以苍术酮为指标成分，尚无含量测定项。而苍术酮是我国传统中药白术及苍术(Rhizoma Atractylodis)等苍术属药用植物挥发油的主要活性成分[6]，仅用苍术酮作为白术的鉴别指标不具有专属性。此外，白术中白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ也为白术的主要活性成分[7]，但相对苍术酮来说含量较低，药典中只用含量较高的苍术酮作为质量控制指标，不能全面反映白术的质量，因此增加除苍术酮以外的白术内酯类成分的TLC鉴别及建立相应的含量测定方法，对于提升白术及含白术的成方制剂的质量控制具有重要意义和价值。
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关于白术的薄层鉴别，除苍术酮之外未见有其他成分的研究，本实验参考其他有关内酯类成分的鉴别研究[8-9]，根据该类成分的理化性质，增加了以白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ为指标成分并结合苍术酮的薄层鉴别方法，该方法专属性强，效果较好。关于白术的含量测定方面，以白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ以及苍术酮多见，研究多采用GC测定苍术酮、苍术醇等挥发性成分的含量[10-11]，以HPLC测定白术中内酯类成分[12]，未见有用UPLC在同波长下同时测定白术中白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ含量的分析方法[13-14]。本文基于UPLC-PDA建立了同时测定白术中白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ含量的分析方法，相对于HPLC具有检测灵敏度较好，分析周期短、进样量少和成本节约等特点，为建立全面可控的白术质量评价方法奠定基础。
1 材料
1.1 仪器, http://www.100md.com(赵玉娇 徐文慧 沈小丽 田俊生 秦雪梅)