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编号:13006771
苦参素通过p38/JNK信号途径对海马神经元凋亡的影响(3)
http://www.100md.com 2017年2月15日 《中国中药杂志》 2017年第4期
     2.3 Hochest 33342染色观察海马神经元凋亡形态 实验分组:①正常对照组(仅加入培养基);②LPS组(10 mg·L-1);③ASA(5.0 mmol·L-1)[9]+LPS(10 mg·L-1)组(阳性药对照组);④OMT中剂量(1.5 g·L-1)+LPS(10 mg·L-1)组。具体步骤如下:于玻片上将培养7 d的海马神经细胞,采用OMT预处理3 h 后,加入终浓度为10 mg·L-1的LPS,作用24 h。取出玻片进行免疫荧光化学染色,进行冲洗。4%多聚甲醛4 ℃固定。10%山羊血清室温封闭1 h弃血清,再次冲洗。Hoechst 33342(1∶1 000稀释)室温15 min,ddH2O冲洗。用抗荧光淬灭封片液封片,荧光显微镜下观察细胞核形态学的变化,进行凋亡核计数并随机拍照。

    2.4 RT-qPCR法检测OMT预处理对LPS诱导的海马神经元Bax,Bcl-2,Caspase-3 mRNA的表达变化 原代培养大鼠海马神经元 ......
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