3.5 隨机双盲测试 为检测方法的可靠性，随机取40批经过确证的样品，按医学双盲测试的要求运用本方法进行检测，鉴别结果与正伪品信息一致，见图5。

    4 讨论

    石斛属Dendrobium Sw.植物全世界约有1 000种，我国有74种2变种，而本研究选取了来自不同产地的铁皮石斛168个和69种194个石斛属的近缘物种共362个样品进行位点特异性PCR研究，几乎囊括了亚洲大陆石斛属全部物种，且铁皮石斛样品量大，采样地点多，具有一定代表性，对保障方法准确性具有重要意义。

    位点特异性PCR具有操作简便、实验周期短的优点，理论上可对任意SNP位点进行分型，已被广泛应用于药材的真伪鉴定和鉴别研究^{[1-3，10-12，15-16]}。位点特异性PCR对反应条件较为严格，退火温度、循环次数、Taq酶种类及PCR仪均可能影响鉴定结果，即当更换其中某一条件时，需重新调校其他条件，故在实验操作方面，引物的筛选和实验条件的优化尤为重要。目前已报道的利用位点特异性PCR对石斛属植物鉴定方法多对复性温度、DNA模板浓度及纯度要求较高^[10-12]，容易导致方法重现性较低 ......