12地黄miRNAs的鉴定根据miRNAs产生的特点，miRNAs的鉴定首先是通过对细胞sRNA直接克隆并测序而获得的。之后，利用生物信息学方法(包括比较基因组预测、同源搜索、利用前体物序列的二级结构特征分析等)预测了许多物种基因组、转录组或EST序列数据库中存在的miRNAs[1214]。近年来，利用高通量测序技术已从65种植物中鉴定了7 827个miRNAs家族(miRBase 210 数据库)。2011年，Yang等[7，9]利用高通量测序技术构建了头茬和重茬地黄sRNAs文库，利用生物信息学技术首次从地黄中鉴定了25个保守的miRNAs家族。根据miRNAs前体物二级结构特征，以NCBI数据库中仅有的1 536条地黄EST序列作为参考序列，利用RNAfold软件和RTPCR方法，从地黄中克隆并鉴定了6个新型miRNAs (属于6个miRNAs家族)。miRNAs在生物体内广泛存在，其数量约为编码基因总量的1%[15]。前期研究以EST数据库为参考所鉴定的地黄miRNAs种类和数量非常有限，为进一步发掘地黄体内的miRNAs ...... 濠电姷顣介埀顒€鍟块埀顒€缍婇幃妯诲緞閹邦剛鐣洪梺闈浨归崕鏌ョ叕椤掆偓闇夐柨婵嗙墛绾爼鏌℃担闈涒偓婵嬬嵁瀹ュ洠鍋撻敐搴′簼缂併劍姘ㄧ槐鎺戔槈濮楀棙效缂備椒绶ゆ俊鍥箟閹绢喖閱囬柣鏂垮濡差垶姊洪崫鍕殶濠殿喚鏁稿☉鐢稿醇閺囩偠鎽曢梺闈涳紡閸曨厾鏆梻浣烘嚀閻°劑鎮ч弮鍌滅當闁告侗鍠楁慨婊堟煢濡警妲哥€殿喖娼￠弻锟犲磼濮橆厾銈紓浣介哺缁诲牆鐣烽敐澶樻晬婵犻潧妫楅獮瀣⒑閸濆嫬顏撮柛銊ф暬閿濈偤鏁冮崒姘鳖啇濠电姴锕ら幊搴ㄥ磻瀹ュ洠鍋撳▓鍨灍婵炲弶锕㈤獮鏍川婵犲倻绐為柡澶婄墐閺呮粓宕洪崒鐐寸厓闁靛濡囬惌搴㈢箾閺夋垶顥㈤柟顖氱У閹峰懎霉鐎ｎ亙澹曞┑鐘茬仛閹稿墽绮堟径鎰仯闁搞儺鍓﹀Λ鎴︽煕鐎ｅ墎绉€规洘鐟ч幏鐘绘嚑椤掍胶绉虫俊銈囧Х閸嬬偛煤濡亽鈧帡鎳滈悽纰樻灃闁诲函缍嗛崑鍛存偂濞嗘挻鐓熼柕濞垮劚椤忋倝鏌嶈閸撴氨鍒掓惔銊ユ瀬闁归棿鐒﹂崵鍥煙鐎电ǹ孝妞わ絽銈搁弻宥夊Ψ閿斿墽鐣洪梺鎼炲妸閸旀垿宕归幆褉鍫柛鎰╁妽閺嬪墽绱撻崒姘殲闁搞劌娼℃俊瀛樺緞閹邦剛浼嬪┑鐘绘涧楗挳宕箛娑欌拻闁稿被鍊曢弸鏃堟煃瑜滈崜銊╁箯閿燂拷


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