祁州漏芦通过下调JNK和NFκB抑制H2O2致肝细胞凋亡(2)
1材料11药物与试剂将祁州漏芦切碎后加水煎煮,滤液经减压蒸馏即得祁州漏芦提取物(RU)干品,主要成分为多糖(81%)和甾酮(12%)[6];用无血清培养液配成所需浓度,过滤除杂除菌备用。人HepG2肝癌细胞购自南京凯基生物有限公司。DMEM培养基、胎牛血清购自Gibco公司;MTT购自SigmaAldrich公司; LDH,ALT,AST,MDA,GSH,SOD试剂盒购自南京建成科技有限公司;Caspase3,8,9检测试剂盒、线粒体/细胞核制备试剂盒购自江苏凯基生物技术股份有限公司;兔NFκB p65多克隆抗体、兔pNFκB p65多克隆抗体、小鼠ERK多克隆抗体、兔pERK多克隆抗体、兔JNK多克隆抗体、兔pJNK多克隆抗体、兔p38多克隆抗体、兔pp38 MAPK多克隆抗体购自Abcam公司;兔Cleaved Caspase3(Casp3)单克隆抗体、兔细胞色素c(Cyto c)单克隆抗体购自Cell Signaling公司。
12仪器二氧化碳培养箱(美国Shellab公司);台式高速冷冻离心机(德国Eppendorf公司);酶标仪(深圳雷杜公司);垂直版电泳仪及转印槽(美国BioRad公司);凝胶成像分析仪(美国UVP公司) ......
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