UPLCPDA同时测定藏药翼首草环烯醚萜苷和酚酸类10个化学成分的含量(1)
[摘要] 建立超高效液相色谱法(UPLCPDA)同时测定藏药翼首草环烯醚萜和酚酸类10个化学成分的含量。采用Acquity UPLCR BEH C18(2.1 mm ×100 mm，1.7 μm)色谱柱，流动相0.2%磷酸水(A)乙腈(B)，梯度洗脱，检测波长237，325 nm，流速0.4 mL·min-1，柱温30 ℃，进样量1 μL。研究结果表明UPLCPDA法定量分析翼首草10个化学成分在考察的范围内线性关系良好(r≥0.999 7)；加样回收率为96.30%～103.0%(n=9)，RSD为0.72%～2.9%(n=9)。所建立UPLC方法简便、准确、重复性好，可同时测定藏药翼首草中10个化学成分的含量。
[关键词] 藏药； 翼首草； UPLCPDA； 环烯醚萜； 酚酸； 含量测定
Simultaneous determination of ten major compounds including iridoid
glycosides and phenolic acids in Pterocephalus hookeri by UPLCPDA
TANG Ce1， WEN Jian1， WANG Jing1， ZHAO Kehui1， FAN Gang1， MENG Xianli1， ZOU Zhongmei2， ZHANG Yi1*
(1.College of Ethnic Medicine， Chengdu University of Traditional Chinese Medicine， Chengdu 611137， China；
2.Institute of Mechcinal Plant Development， Chinese Acadeuy of Medical Scieuce and Peking Union Medical
College， Beijing 100193， China)
[Abstract] This study is to develop an UPLCPDA method for determination of 10 major components in Pterocephalus. The UPLCPDA assay was performed on a Waters Acquity UPLCR BEH C18(2.1 mm ×100 mm，1.7 μm)， and the column temperature was at 30 ℃. The mobile phase consists of water containing 0.2% phosphoric acid (A) and acetonitrile (B) in gradient elution at a flow rate of 0.4 mL·min-1. The detection wave length was set at 237 and 325 nm， and the injection volume was 1 μL in the UPLC system. The linear range of 10 detected compounds were good (r≥0.999 7)， and the overall recoveries ranged from 96.30% to 103.0%， with the RSD ranging from 0.72% to 2.9%. The method was simple， accurate and reproducible， which can be used for the simultaneous determination of the content of ten major components in P. hookeri.
[Key words] Tibetan medicine； Pterocephalus hookeri； UPLCPDA； iridoid glycoside； phenolic acid； content determination
翼首草(藏語名：榜孜毒乌)为川续断科匙叶翼首草Pterocephalus hookeri(C.B.Clarke)Heck 的干燥全草，收载于2015年版《中国药典》(一部)[1]及卫生部《藏药部颁标准》[2]中，为常用藏药。翼首草主要含有环烯醚萜类和皂苷类成分，如马钱苷、吴茱萸苷、齐墩果酸和熊果酸等[39]，具有抗病毒、抗氧化及提高免疫力等作用。课题组前期对翼首草进行了LCQTOFMS的化学成分分析，首次发现翼首草中含有大量的马钱苷酸、异绿原酸A、异绿原酸C、林生续断苷Ⅰ、续断苷B和续断苷A，且这些化学成分具有较强的紫外吸收。因此，本文采用UPLCPDA对其环烯醚萜和酚酸类10个化学成分进行含量测定，为翼首草的质量控制提供新的科学依据。
1 材料
Waters Acquity UPLCTM超高效液相色谱仪，包括四元溶剂管理系统、样品管理系统、PDA检测器、Empower色谱工作站(美国Waters公司)；BT125D 1/10万电子天平(德国Sartorius公司)；KQ500E超声波清洗器(江苏省昆山市超声仪器有限公司)。
马钱苷酸(111865201102)、绿原酸(110753201413)和马钱苷(111640201509)购自中国食品药品检定研究院；异绿原酸A(16031611)、异绿原酸C(16031613)购自成都曼思特生物科技有限公司；獐牙菜苷、林生续断苷Ⅰ、吴茱萸苷、续断苷B和续断苷A由本实验室分离制备；经光谱及高效液相色谱分析确认，纯度均在98%以上。HPLC级甲醇、乙腈(美国J.T.Baker公司)，水为屈臣氏蒸馏水(可供UPLC/UPLCMS测定)；HPLC级甲酸(美国Tedia公司)。甲醇、磷酸试剂均为分析纯。 (唐策文检王静 赵可惠 范刚孟宪丽 邹忠梅 张艺)
[关键词] 藏药； 翼首草； UPLCPDA； 环烯醚萜； 酚酸； 含量测定
Simultaneous determination of ten major compounds including iridoid
glycosides and phenolic acids in Pterocephalus hookeri by UPLCPDA
TANG Ce1， WEN Jian1， WANG Jing1， ZHAO Kehui1， FAN Gang1， MENG Xianli1， ZOU Zhongmei2， ZHANG Yi1*
(1.College of Ethnic Medicine， Chengdu University of Traditional Chinese Medicine， Chengdu 611137， China；
2.Institute of Mechcinal Plant Development， Chinese Acadeuy of Medical Scieuce and Peking Union Medical
College， Beijing 100193， China)
[Abstract] This study is to develop an UPLCPDA method for determination of 10 major components in Pterocephalus. The UPLCPDA assay was performed on a Waters Acquity UPLCR BEH C18(2.1 mm ×100 mm，1.7 μm)， and the column temperature was at 30 ℃. The mobile phase consists of water containing 0.2% phosphoric acid (A) and acetonitrile (B) in gradient elution at a flow rate of 0.4 mL·min-1. The detection wave length was set at 237 and 325 nm， and the injection volume was 1 μL in the UPLC system. The linear range of 10 detected compounds were good (r≥0.999 7)， and the overall recoveries ranged from 96.30% to 103.0%， with the RSD ranging from 0.72% to 2.9%. The method was simple， accurate and reproducible， which can be used for the simultaneous determination of the content of ten major components in P. hookeri.
[Key words] Tibetan medicine； Pterocephalus hookeri； UPLCPDA； iridoid glycoside； phenolic acid； content determination
翼首草(藏語名：榜孜毒乌)为川续断科匙叶翼首草Pterocephalus hookeri(C.B.Clarke)Heck 的干燥全草，收载于2015年版《中国药典》(一部)[1]及卫生部《藏药部颁标准》[2]中，为常用藏药。翼首草主要含有环烯醚萜类和皂苷类成分，如马钱苷、吴茱萸苷、齐墩果酸和熊果酸等[39]，具有抗病毒、抗氧化及提高免疫力等作用。课题组前期对翼首草进行了LCQTOFMS的化学成分分析，首次发现翼首草中含有大量的马钱苷酸、异绿原酸A、异绿原酸C、林生续断苷Ⅰ、续断苷B和续断苷A，且这些化学成分具有较强的紫外吸收。因此，本文采用UPLCPDA对其环烯醚萜和酚酸类10个化学成分进行含量测定，为翼首草的质量控制提供新的科学依据。
1 材料
Waters Acquity UPLCTM超高效液相色谱仪，包括四元溶剂管理系统、样品管理系统、PDA检测器、Empower色谱工作站(美国Waters公司)；BT125D 1/10万电子天平(德国Sartorius公司)；KQ500E超声波清洗器(江苏省昆山市超声仪器有限公司)。
马钱苷酸(111865201102)、绿原酸(110753201413)和马钱苷(111640201509)购自中国食品药品检定研究院；异绿原酸A(16031611)、异绿原酸C(16031613)购自成都曼思特生物科技有限公司；獐牙菜苷、林生续断苷Ⅰ、吴茱萸苷、续断苷B和续断苷A由本实验室分离制备；经光谱及高效液相色谱分析确认，纯度均在98%以上。HPLC级甲醇、乙腈(美国J.T.Baker公司)，水为屈臣氏蒸馏水(可供UPLC/UPLCMS测定)；HPLC级甲酸(美国Tedia公司)。甲醇、磷酸试剂均为分析纯。 (唐策文检王静 赵可惠 范刚孟宪丽 邹忠梅 张艺)