基于MAPK通路研究五味甘露药浴散加减方治疗类风湿关节炎的药效机制(3)
2.3 AA大鼠踝关节滑膜组织ERK1/2，p38表达的测定 免疫组化法测定大鼠踝关节滑膜组织ERK1/2，p38的表达，给药4周，大鼠麻醉取血处死，剪下致炎侧足踝关节，用10%甲醛固定，不同浓度梯度乙醇逐级脱水，石蜡包埋，切片，采用SP免疫组化法，一抗稀释比为1∶200，显色后中性树胶封片。切片染色后，阳性表达颜色为浅黄色或棕黄色，表达主要集中在细胞浆、细胞膜或间质等，阴性表达为蓝色，底色为白色。
2.4 RTPCR法测定受试药物对AA大鼠膝关节滑膜组织JNK1，ERK1，p38基因表达的影响 给药结束后，大鼠腹腔注射10%水合氯醛3 mL·kg-1麻醉，腹主动脉取血处死固定，钝性分离关节囊的纤维层和滑膜层，无菌剥离完整滑膜组织，称量，放入1.5 mL EP管中，加入质量10倍体积的RNAlater备用。cDNA链合成：按逆转录试剂盒说明书操作。取上述反转后的cDNA，进行PCR扩增。引物序列包括：JNK1的上游引物5′TTTGGAGGAGCGAACT3′，下游引物5′GTCTGTATCCGAGGC3′；ERK1的上游引物5′GGGGTCTCCTCGTTCA3′，下游引物5′AGCCCTTCCATTCCA3′；p38的上游引物5′ CAGGGTAGTGGAGTGAT3′，下游引物5′CGTAAGGGACAGGAAT3′ ......
您现在查看是摘要页，全文长 5063 字符。
2.4 RTPCR法测定受试药物对AA大鼠膝关节滑膜组织JNK1，ERK1，p38基因表达的影响 给药结束后，大鼠腹腔注射10%水合氯醛3 mL·kg-1麻醉，腹主动脉取血处死固定，钝性分离关节囊的纤维层和滑膜层，无菌剥离完整滑膜组织，称量，放入1.5 mL EP管中，加入质量10倍体积的RNAlater备用。cDNA链合成：按逆转录试剂盒说明书操作。取上述反转后的cDNA，进行PCR扩增。引物序列包括：JNK1的上游引物5′TTTGGAGGAGCGAACT3′，下游引物5′GTCTGTATCCGAGGC3′；ERK1的上游引物5′GGGGTCTCCTCGTTCA3′，下游引物5′AGCCCTTCCATTCCA3′；p38的上游引物5′ CAGGGTAGTGGAGTGAT3′，下游引物5′CGTAAGGGACAGGAAT3′ ......
您现在查看是摘要页，全文长 5063 字符。