中药血清药物化学研究进展(3)
2.4.2 血样制备 血样通常分为血清及血浆。若需制得血浆,则需在取血管内加入适量抗凝剂(多为肝素),血清则无要求,见表2。实际研究中,为提高血中移行成分的检测浓度,减弱个体差异性,增加研究的合理性和操作性,可将同组中不同实验动物的血样混合处理[2123]。
2.4.3 血样处理 血样中含有的多种内源性蛋白严重干扰血中移行成分的检测分析,故应首先去除蛋白质。主要方法有溶剂法、酶解法、超滤法、加热法等。处理后,有时因其他内源性物质的干扰或待测组分的含量较低等原因,导致检测时干扰物质过多不便分析或未达到检测限度的现象,可通过分离纯化法进行选择性提取及富集予以解决。总结所查文献,发现近年除蛋白质的方法以溶剂法为主,分离纯化法以萃取法为主,见表3。
2.5 血中移行成分分析
血中移行成分的确认、鉴定及分析方法,多是建立在不同级别的LCUV及LCMS技术上,通过不同的分析方法得出结果。除直接将体外图谱、体内空白图谱、对照品与血样的图谱通过保留时间及一些特征性指标核对外,吴贤波等[32]采用HPLCQTOF Ⅱ技术对防风的血中移行成分采用有机溶剂沉淀 加入与水混溶的有机试剂,一般多为甲醇与乙腈,得到其上清液pH 8.5~9.5,较乙醇、丙酮等试剂影响pH小。血样与有机试剂体积比一般为1∶(1~4)时,可将97%以上的蛋白除去 ......
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2.4.3 血样处理 血样中含有的多种内源性蛋白严重干扰血中移行成分的检测分析,故应首先去除蛋白质。主要方法有溶剂法、酶解法、超滤法、加热法等。处理后,有时因其他内源性物质的干扰或待测组分的含量较低等原因,导致检测时干扰物质过多不便分析或未达到检测限度的现象,可通过分离纯化法进行选择性提取及富集予以解决。总结所查文献,发现近年除蛋白质的方法以溶剂法为主,分离纯化法以萃取法为主,见表3。
2.5 血中移行成分分析
血中移行成分的确认、鉴定及分析方法,多是建立在不同级别的LCUV及LCMS技术上,通过不同的分析方法得出结果。除直接将体外图谱、体内空白图谱、对照品与血样的图谱通过保留时间及一些特征性指标核对外,吴贤波等[32]采用HPLCQTOF Ⅱ技术对防风的血中移行成分采用有机溶剂沉淀 加入与水混溶的有机试剂,一般多为甲醇与乙腈,得到其上清液pH 8.5~9.5,较乙醇、丙酮等试剂影响pH小。血样与有机试剂体积比一般为1∶(1~4)时,可将97%以上的蛋白除去 ......
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