雷公藤单萜合酶基因TwMS的克隆及蛋白表达分析(4)
3.4 MeJA 誘导TwMS基因表达分析
利用MeJA对雷公藤悬浮细胞进行诱导,利用实时荧光定量 PCR 检测以及 2-ΔΔCt 分析对TwMS基因进行相对定量表达分析表明,雷公藤单萜合酶基因TwMS对MeJA的诱导非常敏感,诱导后12 h,MeJA 处理组中基因的表达量上升到0 h的670倍,并于24 h达到最高诱导水平,处理组基因表达水平是同期对照组的1 172.3倍,240 h时TwMS基因的表达恢复至正常水平。
3.5 IPTG 诱导 TwMS蛋白表达分析
TwMS蛋白诱导表达的SDSPAGE 扫描结果表明,在 IPTG 诱导大肠杆菌BL21(DE3)表达后,含有pMALc2X空载质粒的菌株在 42 kDa 处表达了MBP 标签蛋白,含有重组质粒pMALc2XTwMS的菌株在约112 kDa 处有蛋白条带 ......
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利用MeJA对雷公藤悬浮细胞进行诱导,利用实时荧光定量 PCR 检测以及 2-ΔΔCt 分析对TwMS基因进行相对定量表达分析表明,雷公藤单萜合酶基因TwMS对MeJA的诱导非常敏感,诱导后12 h,MeJA 处理组中基因的表达量上升到0 h的670倍,并于24 h达到最高诱导水平,处理组基因表达水平是同期对照组的1 172.3倍,240 h时TwMS基因的表达恢复至正常水平。
3.5 IPTG 诱导 TwMS蛋白表达分析
TwMS蛋白诱导表达的SDSPAGE 扫描结果表明,在 IPTG 诱导大肠杆菌BL21(DE3)表达后,含有pMALc2X空载质粒的菌株在 42 kDa 处表达了MBP 标签蛋白,含有重组质粒pMALc2XTwMS的菌株在约112 kDa 处有蛋白条带 ......
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