鱼腥草素钠及其与红霉素联用对产膜表皮葡萄球菌luxS,agr/RNAⅢ 影响的研究(3)
2.3 表皮葡萄球菌RNA抽提
取冻存于-70 ℃的菌体,加液氮研磨菌体至粉末状;加入350 μL裂解液RL,涡旋振荡30 s,12 000 r·min-1,4 ℃离心5 min;取上清加入250 μL无水乙醇,转入吸附柱CR3中(吸附柱放在收集管中),12 000 r·min-1,4 ℃离心1 min;向吸附柱CR3中加入350 μL去蛋白液RW1,12 000 r·min-1,4 ℃离心1 min,弃废液;再向吸附柱CR3中央加入80 μL DNaseⅠ工作液,放置10 min;加入350 μL去蛋白液RW1,12 000 r·min-1,4 ℃离心1 min;加入500 μL漂洗液RW,放置2 min,12 000 r·min-1,4 ℃离心1 min(重复该步骤1次) ......
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取冻存于-70 ℃的菌体,加液氮研磨菌体至粉末状;加入350 μL裂解液RL,涡旋振荡30 s,12 000 r·min-1,4 ℃离心5 min;取上清加入250 μL无水乙醇,转入吸附柱CR3中(吸附柱放在收集管中),12 000 r·min-1,4 ℃离心1 min;向吸附柱CR3中加入350 μL去蛋白液RW1,12 000 r·min-1,4 ℃离心1 min,弃废液;再向吸附柱CR3中央加入80 μL DNaseⅠ工作液,放置10 min;加入350 μL去蛋白液RW1,12 000 r·min-1,4 ℃离心1 min;加入500 μL漂洗液RW,放置2 min,12 000 r·min-1,4 ℃离心1 min(重复该步骤1次) ......
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