基于UPLC—Q—TOF/MS的RAW264.7细胞炎症模型的代谢指纹分析(3)
3 结果与讨论
3.1 Griess试剂盒检测培养基中NO含量结果
用一系列对照品浓度与其对应的吸光度A作标准曲线，并进行直线相关回归分析，得出其直线回归方程为y=115.41x-6.962 2，R2=0.999 9。将每组样品测得的A代入该直线回归方程中，即得到相应的NO含量。加入LPS后培养24 h，正常组RAW264.7 细胞NO分泌量为0.80 μmol·L-1，模型组RAW264.7 细胞NO分泌量为7.01 μmol·L-1，LPS明显提高了RAW264.7细胞NO的分泌(P<0.01)，说明造模成功。
3.2 细胞提取方法的优化
本研究采用超纯水冲洗细胞，液氮淬灭，同时考察了4种提取溶剂对细胞代谢物检测的影响，这4种提取试剂包括MeOH，ACN，MeOH-ACN-H2O(2∶2∶1)，MeOH-CHCl3-H2O(8∶1∶1) ......
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3.1 Griess试剂盒检测培养基中NO含量结果
用一系列对照品浓度与其对应的吸光度A作标准曲线，并进行直线相关回归分析，得出其直线回归方程为y=115.41x-6.962 2，R2=0.999 9。将每组样品测得的A代入该直线回归方程中，即得到相应的NO含量。加入LPS后培养24 h，正常组RAW264.7 细胞NO分泌量为0.80 μmol·L-1，模型组RAW264.7 细胞NO分泌量为7.01 μmol·L-1，LPS明显提高了RAW264.7细胞NO的分泌(P<0.01)，说明造模成功。
3.2 细胞提取方法的优化
本研究采用超纯水冲洗细胞，液氮淬灭，同时考察了4种提取溶剂对细胞代谢物检测的影响，这4种提取试剂包括MeOH，ACN，MeOH-ACN-H2O(2∶2∶1)，MeOH-CHCl3-H2O(8∶1∶1) ......
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