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编号:13095057
金银花配方颗粒的位点特异性PCR鉴别研究(3)
http://www.100md.com 2017年10月8日 《中国中药杂志》 2017年第13期
     3.1 金银花位点特异性PCR鉴别结果

    凝胶电泳结果表明,所有样品仅金银花特异性鉴别引物Jinyinhua-1.F/R在退火温度>53 ℃扩出条带,当退火温度为59,61,63 ℃时仅金银花出现特异性鉴别条带,混伪品无条带。大于30个循环时,金银花样品均出现明显条带,30~45循环时,金银花出现特异性鉴别条带。DNA浓度在0.5~100 mg·L-1时均可获得扩增。因此,本文最终确定的金银花特异性PCR的反应参数为95 ℃预变性5 min 后,(95 ℃ 20 s,63 ℃ 20 s,72 ℃ 20 s)共40个循环,并使用该条件对金银花及其同属混伪品进行扩增,结果金银花均出现条带,混伪品无条带,见图1。

    3.2 金银花配方颗粒的位点特异性PCR鉴别

    根据3.1项获得的金银花位点特异性PCR鉴别体系,对金银花配方颗粒PCR鉴别反应参数进行筛选和优化,见表3。使用优化后的PCR反应条件对不同来源金银花配方颗粒或基原植物进行扩增 ......
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