狭叶锦鸡儿根化学成分及抗肿瘤活性研究(2)
二氧化碳培养箱(日本三洋公司);XDS 1B倒置显微镜(日本Nikon公司);低温离心机(德国Eppendorf);全自动酶标仪(BIORAD,美国);MTT(美国 Sigma公司);1640培养基(美国Gibico公司);胎牛血清;DMSO;胰蛋白酶。人宫颈癌细胞HeLa,人肝癌细胞HepG2,人肺癌细胞A549均购自协和细胞资源中心。狭叶锦鸡儿根于2014年6月采自新疆奇台县半截沟(经度E43°39′3042″,纬度N89°44′1573″),经新疆维吾尔自治区中药民族药研究所贾晓光研究员鉴定为C stenophylla的根,凭证标本存放于新疆维吾尔自治区中药民族药研究所标本室。
2提取分离
狭叶锦鸡儿根134 kg,干燥、粉碎后用80%乙醇浸泡24 h,加热回流提取3次,每次2 h,合并提取液并减压浓缩,用水混悬后,依次用二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,萃取液减压浓缩后得二氯甲烷萃取物163 g,乙酸乙酯萃取物92 g,正丁醇萃取物335 g。
二氯甲烷萃取物(160 g)经硅胶柱色谱(100~200目),用石油醚乙酸乙酯系统(100∶0,100∶1 ......
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