蛇类中药饮片分子鉴别方法的研究进展(3)
综上所述,DNA条形码技术在物种分子鉴别领域发展迅速,对于物种亲缘关系和遗传多样性的研究相比于其他线粒体DNA分子标记物准确性更高,包含的遗传信息更多。但是仍然存在不足之处:①不能用于混合物鉴别;②中药材炮制过程中,硫磺熏蒸对DNA检测存在干扰;③同一物种若存在种内变异,如何确定种内阈值是个难题[28];④mtDNA中假基因的存在容易产生旁系同源扩增,干扰结果判断[29]。4其他分子检测方法
以上3种分子鉴别方法根据靶序列性质的不同,分别采用随机引物、特异性引物、通用引物进行PCR扩增,但它们最后都通过凝胶电泳进行检测。虽然凝胶电泳是常见的核酸分离方法,但是在实际操作中需要开管取样,易产生交叉污染,且耗时长,增加了分子检测的时间和人工成本。实时荧光PCR检测方法虽然可实现闭管无污染的检测[30],但仪器昂贵、技术要求高,限制了其在基层单位的应用。近几年,随着材料学的发展,可视化的检测方法引起了研究者的兴趣,其中最为典型的是基于荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer ......
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