25qRTPCR检测细胞膜麦角甾醇生物合成相关基因的表达[10]

    总RNA的提取：2 mL菌液(2×106 CFU/mL)与2 mL终浓度分别为0，256，512，1 024 mg·L-1BAEB和终浓度为128 mg·L-1的FLZ混合，37 ℃孵育6 h后，离心收集菌体，用无菌PBS冲洗3次后进行总RNA提取，调节RNA浓度，使模板量一致，具体操作方法参照ToyoBo公司MagExtractorRNA提取试剂说明书进行。

    26引物的设计与合成

    基因序列從NCBI获得，并用Oligo70软件设计所需引物，委托上海生工合成引物，各引物情况见表1。

    27逆转录cDNA

    6 μL RNA预变性(65 ℃ 5 min，4 ℃ 1 min)，后加入混合液(4×DNA Master Mix 55 μL和gDNA Remover 11 μL)2 μL ......