通脉方中异黄酮类化合物在人源肠Caco2细胞模型的吸收转运(4)
分别在细胞单层两侧加入受试化合物和HBSS溶液(AP侧05 mL,BL侧15 mL)。细胞单层AP侧给药、BL侧取样分析,为吸收转运试验;BL侧给药、AP侧取样分析,为外流转运试验。每实验点为独立的4个孔。按实验设计配制一定浓度受试化合物的HBSS溶液,于恒温摇床上37 ℃,50 r·min-1温育。按实验设计时间点分别收集一定体积的给药侧和接收侧溶液(AP侧045 mL,BL侧130 mL),冷冻干燥,-20 ℃冰箱中保存,待处理。
217细胞摄入试验
216项取样全部结束后,小心移走transwell中的溶液,以冷的HBSS溶液洗涤3次,放置在-20 ℃冷冻保存,1 d后取出放置融化,如此重复冻融3次,将细胞附着的聚碳酯膜取出,置于02 mL 70%甲醇中,涡旋混匀后超声溶解20 min,再15 000×g离心10 min,取上清液,即得细胞摄入分析样品。
218分析样品处理
经Caco2细胞单层试验后收集的样品经冷冻干燥 ......
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