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编号:13105901
保元汤心肌保护作用靶点群的鉴定与功能分析(3)
http://www.100md.com 2017年10月1日 《中国中药杂志》 2017年第19期
     2.2.3 中藥化学成分的固相微球包被 将表面含二苯甲酮结构单元的聚合物微球PSt-BP(0.01 g),保元汤提取物(0.01 g)及20 mL去离子水加入一带磨口、平面石英盖的直管光照反应瓶中,通入N2 30 min后,置于UV光下(375 W汞灯,光强12.5 W·m-2,λ=254 nm)反应1 h,所得产物经离心分离,并用去离子水洗涤至少3次。

    2.2.4 靶点群的富集与鉴定 将表面包被有保元汤化学组分的微球及表面未被保元汤化学组分包被的微球分别与小鼠心脏组织裂解液充分混合,于4 ℃下孵育12 h,使保元汤与靶点蛋白充分结合。然后用0.1%SDS洗脱液反复清洗微球6遍,并加入适量的loading buffer(6×),98 ℃,煮沸8 min。然后8 000 r·min-1离心5 min,取上清液并进行SDS-PAGE凝胶电泳,银染并对2组有差异蛋白条带进行酶解和高分辨质谱鉴定,检索每个靶点蛋白的属性及名称。

    2.2.5 作用靶点群的KEGG通路分析 Cytoscape是一个网络可视化和分析的开放性免费软件,它根据基本的数据结合成可视化网络,进行网络参数分析和生物功能注释[10] ......
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