加味五子衍宗丸神经保护作用靶点群的鉴定与功能分析(2)
1.3 仪器 冷冻干燥机(FDU-1100,Eyela,日本);微量紫外分光光度计(ND-1000,NanoDrop公司,美国);Sunrise-Basic酶标仪(TECAN公司)。1.4 细胞培养与处理 SHSY5Y神经胶质细胞系用高糖DMEM培养基(含10%胎牛血清,100 U·L-1青霉素,100 μg·L-1链霉素)进行传代培養,每2 d传代1次。收集1×107左右的细胞,加入细胞裂解液(Tris,pH 7.4,150 mmol·L-1 NaCl,1% NP-40,cocktail蛋白酶抑制剂)后,冰浴30 min,然后在4 ℃下12 000 r·min-1离心20 min,取上清液并保存。
1.5 磁性光敏微球的制备 采用共沉淀法制备Fe3O4纳米粒子:将FeSO4·7H2O(0.35 g),FeCl3·6H2O(0.32 g),HS-PEG1k-SH(0.1 g,按文献方法自制[5])及30 mL去离子水加入100 mL三口烧瓶中;搅拌、通N2 ......
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