银杏二萜内酯葡胺注射液对大鼠局灶性脑缺血的保护作用(3)
将染色后的脑组织置于110 ℃烘箱烘干,对照大脑湿重求出脑含水量如下。脑组织含水量=(1-脑组织干重/脑组织湿重)×100%
2.3.3 脑组织匀浆中SOD,GSH,MDA,LA量的检测 缺血再灌注24 h后,大鼠断头处死,取脑,去除小脑。将大脑用生理盐水制成10%匀浆,按南京建成生物工程研究所提供的试剂盒说明书,测定大脑组织中的超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽(GSH),丙二醛(MDA)和乳酸(LA)含量。脑匀浆蛋白含量按考马斯亮蓝法测定[10]。
2.3.4 脑脊液中氨基酸类神经递质Glu和Asp 及Ca2+,CK-BB,LDH 测定 再灌注 24 h 后,大鼠以10%水合氯醛麻醉,剪开背面颈部皮肤,钝性分离颈部肌肉,暴露枕骨大孔。将大鼠头向腹面弯曲,用 1 mL 一次性注射器轻轻刺穿脑膜,抽取脑脊液约 100 μL。所得脑脊液以1 000 r·min-1离心3 min,取上清液,超滤杯过滤离心(8 000 r·min-1离心5 min)后待用。取过滤后的脑脊液样品 10 μL,行柱前衍生化反应并HPLC分析Glu和Asp。Ca2+,CK-BB,LDH 的测定严格按照各试剂盒操作要求进行测定[11] ......
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