2.4 特异性引物PCR反应体系的优化 以回收2.3特异性条带为优化模板DNA，对模板DNA、引物、dNTP、Mg2+和Taq酶5个因素的适宜浓度进行优化[4-6]，具体见表2，PCR反应程序同上。

    采用L16(45)正交试验确定该PCR反应体系5个因素的最优组合，每个因素依据单因素试验结果设定4个水平。正交试验水平信息见表3。

    2.5 特异性引物PCR反应验证 根据优化的PCR体系对另24株供试人参基因进行扩增，电泳检测结果。测定和分析各株人参皂苷，方法同2.3，验证引物的准确性。

    2.6 特异性片段测序与分析 使用凝胶回收试剂盒回收特异性条带，并送往TKARA公司进行测序。测序结果与NCBI数据库进行同源性比对。

    3 结果与分析

    3.1 DNA提取 供试人参DNA经1%琼脂糖凝胶电泳检测，条带清晰，见图1。经酶标仪检测，DNA样品A260/A280均在1.8～2.0，说明所提DNA完整性好，纯度较高，可作为PCR的模板。

    3.2 特异性引物筛选 引物扩增结果见图2，仅GC1引物的13，14号样品分别在约2 000，1 200 bp处各有1条特异性条带，14号人参样品9种皂苷加和值最高，见图3和表4。

    3.3 特异性引物PCR反应体系优化 GC1引物的最优PCR体系为：DNA质量浓度2.60 mg·L-1 ......