全基因组扩增应用于胚胎植入前遗传学诊断(2)
MDA是一种基于链置换和环状滚动扩增的全基因组扩增技术。该技术利用一种φ29 DNA聚合酶催化六聚体随机引物对基因组进行扩增，其反应条件为在30℃下恒温。扩增时，六聚体随机引物在多个位点与模板DNA退火，在φ29 DNA聚合酶的作用下同时启动复制。引物沿着模板链延长，同时取代模板的互补链。被置换的互补链又作为新的模板完成一次扩增，经过长时间的循环，最终经过65℃灭活可获得大量的DNA。该技术适用于各种样本，低DNA含量的样本，尤其是在临床应用中常出现的单细胞取材，如单个淋巴细胞、单个精子、单个滋养层细胞或卵裂球等。也可直接从新鲜或干燥的全血、白膜层和培养的细胞等进行扩增，也可是石蜡包埋的样品，但效果较差[8]。
在临床应用中，MDA表现出高扩增效率和精确性，相较于以PCR基础的WGA方法，MDA表现出显著的优势。2009年Ren等[9]通过MDA技术扩增单细胞基因组DNA完成两家DMD临床PGD实验，每个家系均分析了一个DMD基因的突变位点和6个STR连锁标记，最后各出生一个健康的女孩。2010年Eduardo等[10]用MDA技术结合PCR-连锁分析完成了1家PKHD1家系的临床PCR实验 ......
您现在查看是摘要页，全文长 4376 字符。
在临床应用中，MDA表现出高扩增效率和精确性，相较于以PCR基础的WGA方法，MDA表现出显著的优势。2009年Ren等[9]通过MDA技术扩增单细胞基因组DNA完成两家DMD临床PGD实验，每个家系均分析了一个DMD基因的突变位点和6个STR连锁标记，最后各出生一个健康的女孩。2010年Eduardo等[10]用MDA技术结合PCR-连锁分析完成了1家PKHD1家系的临床PCR实验 ......
您现在查看是摘要页，全文长 4376 字符。