贵州凤冈锌硒茶中常见化学成分测定(2)
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茶氨酸标准液:称取100mg茶氨酸 (纯度不低于99%)溶于100mL水中,作为母液。准确吸取5mL母液,加水定容至50mL作为工作液(1mL含茶氨酸0.1mg)。
氨基酸定量标准曲线的制作:分别吸取0.0、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL氨基酸工作液于一组25mL量瓶中,各加水4mL、茚三酮溶液0.5mL和缓冲液2mL,在沸水浴中加热15min,冷却后加水定容至25mL,按4.3.2的操作测定吸光度(A)。将测得的吸光度与对应的茶氨酸或谷氨酸浓度绘制标准曲线。
准确吸取试液1mL,注入25mL量瓶中,加0.5mLpH8.0缓冲液和0.5mL 2%茚三酮溶液,在沸水浴中加热15min。待冷却后加水定容至25mL。放置10min后,用5mm比色杯,在570nm处,以试剂空白溶液作参比,测定吸光度(A)。
1.7维生素(Vc、VB1、VB6、 维生素B3)的测定:维生素试剂的配制:取少量的维生素C、B1、B2、B6和维生素B3(简称维烟酸、生素PP),用新配制的0.0lmol/L的盐酸将其分别溶解,配成溶液,过滤后避光存放,待用。
样品的处理:用烘箱将茶叶低温烘干(温度不要超过60℃),然后用研钵研碎,用电子天平准确称取茶样,用0.01mol/L的盐酸10mL浸泡,超声清洗振荡30min后,取上层清液过滤,备用。
5种维生素色谱峰分离的色谱条件:色谱柱:Kromasil 100A C18 250 ×4.6mm,流速:1mL/min,流动相:A-0.05mol/L磷酸二氢钾;B-甲醇0~10min A+B=90+10线性变化到A+B=80+20,10-30min由A+B=80+20线性变化到A+B=20+80;柱温:38℃,进样量: 10μL。
1.8HPLC同时测定茶叶中儿茶素和咖啡碱的含量。色谱条件:色谱柱:Kromasil 100A C18 250 ×4.6mm,流动相∶甲醇-水(53∶47 V/V);流速:1mL/min,检测波长:254nm。
咖啡碱对照品溶液的制备:精密称取0.0500g咖啡因对照品加水溶解,定容至100mL量瓶中作为标准贮备液(0 ......
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