摘要：目的： 构建及原核表达肝癌抗原肽(EPVTKAEML)与人热休克蛋白70(HSP70)的融合基因。方法： 采用加端PCR方法， 将EPVTKAEML的基因序列融合到人HSP70基因的3′端； 将融合基因克隆入原核表达载体pET28a(+)中， 构建重组质粒pET28a(+)/EPVTKAEMLHSP70。经限制性内切酶BamH I、 Xho I双酶切鉴定及序列测定后， 转化E.coli BL21(DE3)， 经IPTG诱导表达融合蛋白， SDSPAGE检测表达结果。结果： 应用加端PCR方法扩增出约2.0 kb的目的片段， 序列测定结果证实， EPVTKAEML的基因序列成功地融合到人HSP70基因的3′端。经BamH I、 Xho I酶切鉴定证实， 融合基因成功地克隆到原核表达载体pET28a(+)上； 转入重组质粒的E.coli BL21(DE3)经IPTG诱导后， SDSPAGE分析发现在相对分子质量(Mr)约72000处有表达量明显增多的蛋白条带 ......