shRNA表达载体pWH1的构建及用于HIF1基因的沉默(2)
2 结果2.1 shRNA表达载体pWH1构建的实验结果
2.1.1 从人血细胞基因组DNA中扩增得到H1 RNA基因Promoter PCR反应体系: DNA模板2 μL, P11 μL, P21 μL, Taq 0.5 μL, dNTP 2 μL, 10×buffer 5 μL, H2O 38.5 μL, 总体积50 μL。PCR反应条件为: 94℃ 5 min(94℃ 30 s; 45℃ 45 s; 72℃ 30 s)×5 cycle; (94℃ 30 s; 56℃ 45 s; 72℃ 30 s)×25 cycle; 72℃ 2 min; 4℃保存。10 g/L琼脂糖凝胶电泳后, 在250 bp左右可以见到一扩增条带(图1), 大小与理论预计一致 ......
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