广西卫生厅重点科研课题(2)
1 对象与方法
1.1 对象
本次课题研究对象共210例，均为无血缘关系的广西人群。其中男139例，女71例，平均年龄(47.9±10.1)岁，选自2013年6月至2014年4月右江民族医学院附属医院体检人群的随机个体，血常规及其他生化指标均在参考范围之内，排除心血管疾病及癌症家族史，排除肾脏、肝脏和内分泌疾病。
1.2 方法
1.2.1 基因组DNA提取
用EDTAK2抗凝的采血管采集以上健康体检者静脉血3 ml，参照已建立的方法[8]提取白细胞基因组DNA，放于-70℃冰箱保存备用。
1.2.2 引物设计与合成
依据TGFβ1基因869T/C(Leu10Pro)位点多态性及已知的DNA序列，利用引物设计网站(http：//www.yeastgenome.org/cgibin/webprimer)设计PCR引物，委托上海天昊生物科技有限公司合成。用于本次PCR特异性扩增实验的引物，上游引物序列为：5’CCTCCCCACCACACCAG3’，下游引物序列为：5’CGGCA CCTCCCCCTGGCTCG3’。
1.2.3 PCR扩增
TGFβ1 869T/C(Leu10Pro)的PCR扩增反应体系为20 μL ......
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1.1 对象
本次课题研究对象共210例，均为无血缘关系的广西人群。其中男139例，女71例，平均年龄(47.9±10.1)岁，选自2013年6月至2014年4月右江民族医学院附属医院体检人群的随机个体，血常规及其他生化指标均在参考范围之内，排除心血管疾病及癌症家族史，排除肾脏、肝脏和内分泌疾病。
1.2 方法
1.2.1 基因组DNA提取
用EDTAK2抗凝的采血管采集以上健康体检者静脉血3 ml，参照已建立的方法[8]提取白细胞基因组DNA，放于-70℃冰箱保存备用。
1.2.2 引物设计与合成
依据TGFβ1基因869T/C(Leu10Pro)位点多态性及已知的DNA序列，利用引物设计网站(http：//www.yeastgenome.org/cgibin/webprimer)设计PCR引物，委托上海天昊生物科技有限公司合成。用于本次PCR特异性扩增实验的引物，上游引物序列为：5’CCTCCCCACCACACCAG3’，下游引物序列为：5’CGGCA CCTCCCCCTGGCTCG3’。
1.2.3 PCR扩增
TGFβ1 869T/C(Leu10Pro)的PCR扩增反应体系为20 μL ......
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