泌尿生殖道支原体感染检测及药敏分析进展(2)
2.6 SAT
该技术核酸扩增在42℃下进行,直接以病原体特异性RNA为扩增靶标,以扩增产物RNA为检测靶标,15~30分钟即可将模板扩增109倍,其检测灵敏度和准确性远高于其他核酸检测技术,SAT采用MMLV逆转录酶和T7RNA多聚酶进行核酸扩增,反应抑制物有效减少,假阴性结果也有效下降。扩增产物的污染是核酸检测的控制难点。SAT采用实时荧光闭管检测,扩增产物为RNA,其在环境中易降解,有效控制污染,从而使检测结果大幅提高。郑雅萍等[13]研究发现,在初诊、未经治疗的患者病原体检测中SAT和FQPCR均可作为判断病原体感染的方法,且作用相当,但FQPCR在治疗过程中,不能排除患者治疗后病灶处已经死亡的病原体残留的DNA对检测结果的影响,而SAT只检测病原体的RNA,而完整的RNA片段只存在于活的病原体中,因此治疗后SAT能有效排除病灶处已经死亡的病原体,有利于临床治疗后的疗效观察及愈后判断,避免过度治疗。
2.7 LAMP
该法是基因扩增技术和免疫层析技术相结合建立的一种新型的检测解脲支原体的方法,具有反应时间短、特异性强、扩增效率高等优点,扩增1~10个拷贝的目的基因能够在1 h内完成 ......
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该技术核酸扩增在42℃下进行,直接以病原体特异性RNA为扩增靶标,以扩增产物RNA为检测靶标,15~30分钟即可将模板扩增109倍,其检测灵敏度和准确性远高于其他核酸检测技术,SAT采用MMLV逆转录酶和T7RNA多聚酶进行核酸扩增,反应抑制物有效减少,假阴性结果也有效下降。扩增产物的污染是核酸检测的控制难点。SAT采用实时荧光闭管检测,扩增产物为RNA,其在环境中易降解,有效控制污染,从而使检测结果大幅提高。郑雅萍等[13]研究发现,在初诊、未经治疗的患者病原体检测中SAT和FQPCR均可作为判断病原体感染的方法,且作用相当,但FQPCR在治疗过程中,不能排除患者治疗后病灶处已经死亡的病原体残留的DNA对检测结果的影响,而SAT只检测病原体的RNA,而完整的RNA片段只存在于活的病原体中,因此治疗后SAT能有效排除病灶处已经死亡的病原体,有利于临床治疗后的疗效观察及愈后判断,避免过度治疗。
2.7 LAMP
该法是基因扩增技术和免疫层析技术相结合建立的一种新型的检测解脲支原体的方法,具有反应时间短、特异性强、扩增效率高等优点,扩增1~10个拷贝的目的基因能够在1 h内完成 ......
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