精浆Na+K+ATP酶及降钙素基因相关肽与男性精子质量相关研究(2)
1.3实验方法1.3.1仪器及试剂
CGRP酶及人ATP酶酶联免疫分析试剂盒(生产商U.S.A TSZ biological trade Co.Ltd)、计算机辅助精液分析系统、光学显微镜、微型离心机、酶标仪(芬兰仪器型号352型)。
1.3.2精液标本的收集
依照第5版《世界卫生组织人类精液检查与处理实验室手册》的标准规定进行操作,在留取精液前所有研究对象均禁欲3~7 天,作息饮食正常,在本院以手淫法收取精液标本于专用的取精杯中。随后精液标本将放置于恒温为37℃水浴箱中,待精液完全液化后,先在光学显微镜下常规观察分析,然后取2 ml精液量进行计算机辅助精液分析。将余下精液用微型高速离心机以3000×g速度离心15 min后分离出精浆、精子,留取精浆(光学显微镜下观察内无精子)收集于EP管中冷冻于-80℃冰箱待统一检测。
1.3.3精液常规检查
以人工常规精液分析及计算机辅助精液分析检测精子浓度、活力等相关参数,每份标本检测均由两位资历经验丰富的检验工作人员校正核对。
1.3.4精浆ATP酶及CGRP浓度的检查
实验原理双抗体夹心法:将抗体包装在固相载体微孔板 ......
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