广西壮族人群IL27基因位点rs4740与rs181206多态性研究(2)
1资料与方法1.1一般资料从右江民族医学院附属医院选择150名进行健康体检并且体检结果健康者作为研究对象(2012年1~8月)。研究对象要在广西长期居住(时间>10年),籍贯均为广西,民族均为壮族。在150名研究对象中,男性87名,女性63名,年龄范围25~84岁,各项临床及实验室检查指标均正常。1.2基因组DNA的提取每位受试者抽取静脉血2 ml,使用碘化钠法提取细胞基因组DNA,低温保存待用。
1.3PCR技术通过在NCBI上查找到的白介素基因DNA序列,选择包含rs4740位点和rs181206位点的序列并输入到Primer 5引物设计软件,从而得到用于特异性扩增包含rs4740与rs181206位点白介素基因的PCR上下游引物和延伸引物。其中,rs4740位点的上游引物序列为:5’CAGTGGCCCCTCTCCATCTTCT3’, 下游引物序列为:5’CGAGGACCCAGGTGCTGTCTG3’,延伸引物序列为:5’TTTTTTTTTTCGGCCCCGAGCCAGGTACTAC3’ ......
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