广西壮族人群IL27基因位点rs40837多态性研究(2)
1对象与方法1.1研究对象选择2012年1～8月间在右江民族医学院附属医院进行常规检查的150名健康者作为研究对象。纳入标准：无可查亲缘关系；在广西长期居住(时间>10年)，籍贯均为广西，民族均为壮族。本人无恶性肿瘤史；各项临床及实验室检查指标均正常。其中女性63名，男性87名；年龄25～84岁，平均(52±15)岁。本实验经过右江民族医学院附属医院伦理委员会批准，而且受试者对标本采集知情同意。
1.2基因组DNA的提取抽取150名健康受试者肘正中静脉血2 ml，并用EDTAK2抗凝；通过改良碘化钠法提取白细胞基因组DNA，并放入-80℃冰箱保存待用。
1.3PCR反应在NCBI上查找IL27基因DNA序列，选择包含位点rs40837的序列，并输入引物设计软件Primer5，得到用于特异性扩增包含位点rs40837的IL27基因的PCR上下游引物和延伸引物。其中，上游引物序列为：5’GAGGACCAGAGGGGCTTTCAGT3’，下游引物序列为：5’CCCTGATCGGTGGCTTCTTAGC3’，延伸引物序列为：5’CCAGCCCCCTGCCCCAGGC3’。PCR扩增反应体系20 μL，包括：10×PCR反应缓冲液2.0 μL ......
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