半乳糖配体介导Cmyc反义锁核酸对肝癌细胞增殖和凋亡的影响(3)
1.2.5HepG2細胞凋亡检测采用Annexin VFITC/PI双染色流式细胞技术检测HepG2细胞凋亡情况。根据双变量流式细胞仪的散点图来判断结果,左上象限(Q1)为损伤细胞,右上象限(Q2)为坏死细胞,左下象限(Q3)为活细胞,右下象限(Q4)为凋亡细胞。严格按试剂盒说明书和仪器说明书操作。
1.2.6反义LNA的细胞毒性检测
采用MTT比色法检测反义LNA对细胞活性的影响。
1.3统计学方法
所有数据采用均数±标准差(±s)表示,应用SPSS 19.0统计软件分析,组间比较采用重复测量单因素方差分析的LSD检验,检验水准:α=0.05,双侧检验。
2结果
2.1反义LNA对Cmyc mRNA表达的抑制作用
各组肝细胞Cmyc mRNA逆转录cDNA与内参βActin(设为1)灰度比值,1~4泳道分别为(1014±0022)、(0.843±0.028)、(0661±0021)和(0.335±0016) ......
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