热缺血再灌注损伤早期大鼠肝脏基因表达谱的实验研究(2)
1.2动物分组与取材将16只大鼠按热缺血及再灌注的不同时间随机分四组，每组4只。分为：假手术组、热缺血30 min组、再灌注30 min组、再灌注1 h组。四组均在肝脏中叶相同部位取材。全部标本分为2份，1份固定于10%甲醛溶液中，制作石蜡切片，用作病理学观察；另一份切成边长不超过5 mm大小组织块，置于RNALater(德国Qiagen)中4℃保存过夜后，用作基因表達谱芯片分析。
1.3RNA的抽提和体外反转录、表达探针的制备
采用TRIzol试剂盒(美国Life)抽提大鼠肝组织总RNA。样本 RNA浓度检测合格后，按SuperScriptⅡ试剂盒(美国Gibco)说明进行反转录合成cDNA，纯化后的cDNA进行体外转录、RNA Transcript Labeling Kit(美国Affymetrix)标记合成的cRNA探针 ......
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