基于高效液相色谱—质谱技术的早期胃癌血清代谢组学分析(2)
1.2 仪器与试剂
高效液相色谱-质谱仪:Agilent 1200(G6410A),美国Agilent公司;超纯水系统:Milli-Q,美国Millipor公司;自动液体进样器:美国Agilent公司Agilen;甲醇、乙腈、甲酸、异丙醇,美国Sigma公司。
1.3 样本采集
采集入选人员空腹血标本3 ml于含有肝素钠的采血管中静止1 h凝固分层,离心(3000 rpm 10 min),取上清液分装至离心管,保存于-80℃冰箱待用。
1.4 样本预处理
将低温保存的血清样本放置室温解冻混匀,取100 μL血清放入离心管,加入300 μL乙腈摇晃混匀15 s,室温静置15 min,后在4℃,10 000 rpm离心10 min,取上清液200 μL,在常温下干燥60~90 min,再取上清液用50 μL乙腈/水溶剂(3∶1)复溶,取上清液过0.22 μm水相膜,然后上清液加入100 μL内标(L-2-氯苯丙氨酸有独立的色谱峰,不会干扰正常样本检测 ......
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